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一文看懂PCR实验室建设要点,附仪器设备清单

来源:正一 浏览人数:21 次更新时间:2021.04.05

PCR实验室,又称为临床基因扩增实验室,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的实验室。小谱整理了PCR实验室建设规范,并在文末附上了PCR实验室仪器设备清单,供大家参考~

PCR法可将病毒体内所含的基因进行扩增,从而检测感染者体内是否含有特定的病毒。该检测方法具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被广为认可。PCR实验已广泛应用于临床诊断、各防疫检测部门的禽疫病诊断。

但是,这种实验需要有安全的环境、合理配置的实验室、规范的操作为前提。近年来,PCR实验室的建设越来越规范、重视。

PCR实验室建设

本文主要从临床基因扩增检验实验室的平面布局,空调通风系统设计、气流控制和污染的防制几个方面,对实验室设计中的主要特点进行阐述,并附上PCR实验室常用设备清单。

一、PCR实验室平面布局

临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域:试剂准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。

各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。

二、PCR实验室空调通风系统设计及压力控制

PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

1、PCR实验室试剂贮存和准备区

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。

对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

2、PCR实验室标本制备区

该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

3、PCR实验室扩增反应混合物配制和扩增区

该区域主要进行的操作为DNA或 cDNA扩增。

4、PCR实验室扩增产物分析区

该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。

三、PCR实验室污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。

1、工作区域的严格划分

2、合理的系统设置

3、规范的操作

4、严格的管理

5、完备的实验室配套设施

四、PCR实验室设备清单



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